簡要描述:組織RNA保存液(RNA Later)(下文簡稱“RNA Later")是一種液態(tài)、無毒的組織保存試劑,能迅速穩(wěn)定組織,保護(hù)非冷凍細(xì)胞RNA于原位且不會(huì)導(dǎo)致RNA的降解。
詳細(xì)介紹
品牌 | Life-iLab/李記生物 | 貨號(hào) | AN52L769 |
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合 |
產(chǎn)品描述
組織RNA保存液( RNA Later )(下文簡稱“RNA Later")是一種液態(tài)、無毒的組織保存試劑,能迅速穩(wěn)定組織,保護(hù)非冷凍細(xì)胞RNA于原位且不會(huì)導(dǎo)致RNA的降解。可廣泛應(yīng)用于多種脊椎動(dòng)物樣本(包括腦、心、腎、脾、肝、睪丸、骨骼肌、脂肪、肺和胸腺),對(duì)大腸桿菌、果蠅、組織培養(yǎng)細(xì)胞、全血細(xì)胞和一些植物也有效。
RNA Later不會(huì)影響樣品的后續(xù)處理,可以配合各種常見的 RNA抽提試劑盒使用,例如TRIzol(Cat#AN51L758)、RNAzol、各種RNA提取試劑盒、酚抽法以及利用Oligo(dT)原理的mRNA抽提試劑。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
組織RNA保存液(RNA Later) | AN52L769 | 100mL |
運(yùn)輸與保存
常溫運(yùn)輸。常溫保存,有效期12個(gè)月。
使用方法(只能用于新鮮組織,在浸入RNA Later之前不能冷凍組織)
根據(jù)要保存的各樣本的體積,計(jì)算出所需RNA Later用量(應(yīng)當(dāng)是組織體積的5倍;離心收集2×106細(xì)胞RNA Later的用量是1mL)。
將RNA Later按需要量分裝入自備保存管中。
快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀,立即浸入RNA Later中(厚度一定要<0.5 cm,過厚則RNA Later不能有效滲入)。較小的組織(如大鼠的腎臟、脾臟,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNA Later。
保存時(shí)先將樣本浸入RNA Later后置4℃冰箱過夜(4℃過夜是必需的,這樣可使RNA Later滲入到組織中),然后轉(zhuǎn)移到-20℃冰箱。樣本在-20℃條件下不會(huì)凍結(jié),但在存貯緩沖液中會(huì)有結(jié)晶形成,這并不影響隨后的RNA提取。
在4℃冰箱過夜后,從RNA Later中取出組織塊,直接轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱。【注】:測試表明,在RNA Later中保存的標(biāo)本,反復(fù)凍融至室溫20次不影響RNA的質(zhì)量。
RNA Later 中樣本的RNA提取:
組織:用消毒鑷子將組織從存貯溶液RNA Later中取出,浸泡在RNA提取溶液中。一旦將組織放入RNA提取溶液中,勻漿一定要迅速進(jìn)行。
細(xì)胞:從存貯在RNA Later中的細(xì)胞中提取RNA有兩種操作方法可供選擇:去除RNA Later或者從細(xì)胞與RNA Later的混合物中直接提取RNA。
注意事項(xiàng)
本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
本產(chǎn)品在4℃條件下會(huì)引起沉淀,加熱到37℃即可澄清。
使用RNA Later:
動(dòng)物組織:RNA Later不會(huì)溶解或破壞組織樣本的結(jié)構(gòu)。如果需要的話,仍可將已經(jīng)平衡在RNA Later溶液中的組織取出并分割成更小的塊再重新放入到RNA Later中。
植物組織:許多植物組織可以簡單浸泡在5倍體積的RNA Later中保存。具有自然屏障防止擴(kuò)散的植物如蠟表皮的葉組織可能需要先破壞其屏障,以允許RNA Later進(jìn)入組織。
培養(yǎng)細(xì)胞:沉淀細(xì)胞,先用PBS洗一次,再用少量的PBS懸浮細(xì)胞,然后加5~10倍體積的RNA Later保存。
白細(xì)胞:如果將白細(xì)胞從紅細(xì)胞和血清中分離出來,并按組織培養(yǎng)細(xì)胞一樣處理后,白細(xì)胞便能有效地保存在RNA Later中。不要將全血、血漿或血清中的RNA保存在RNA Later中,因?yàn)樗鼈兊鞍缀窟^高,與RNA Later混合后易形成不溶的沉淀。
細(xì)菌:RNA Later是抑菌的,雖然細(xì)菌在RNA Later中不能生長,但細(xì)胞仍保持其完整性。大腸桿菌保存在RNA Later中4℃條件下1個(gè)月仍很完整,產(chǎn)生不降解的RNA。
去除RNA Later:因?yàn)镽NA Later的濃度比典型的細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)的濃度高,因此用通常沉淀活細(xì)胞的離心力無法沉淀RNA Later中的細(xì)胞(HeLa細(xì)胞大約需要5000g)。
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